Feulgen
Définition
Une coloration de Feulgen est une coloration des acides nucléiques, après hydrolyse acide partielle, basée sur la réaction de Schiff, c'est-à-dire sur la coloration violette prise par les aldéhydes en présence de fuchsine décolorée par l'anhydride sulfureux.
Cette réaction est plus ou moins intense selon, semble-t-il, le degré de spiralisation de la chromatine et est donc particulièrement appropriée pour mettre en évidence les chromosomes dans le noyau, lors de la mitose.
Une coloration de Feulgen :
Coupe de foie colorée avec une coloration de Feulgen montrant de l'ADN dans des hépatocytes (A) de rat témoin (normal).
Explications
La technique de Feulgen colore sélectivement l'ADN et, dans des conditions contrôlées, peut être utilisée pour la détermination photométrique de la teneur en ADN. La réaction comprend deux étapes. Les groupes aldéhyde réagissent ensuite avec le réactif de Schiff, ce qui entraîne une coloration violette.
La réaction de Feulgen est basée sur l'élimination acide-catalysée des bases puriques du désoxyribose, ce qui entraîne la formation d'un aldéhyde qui peut être détecté avec le réactif de Schiff.
La réaction de Feulgen est basée sur la réaction de Schiff pour les aldéhydes par laquelle, par hydrolyse acide, on laisse les aldéhydes libérés du sucre désoxy réagir avec la fuchsine-acide sulfureux pour donner une réaction de couleur magenta typique.
La réaction de Feulgen, proposée par Feulgen et Rossenbeck dans les années 1920, est généralement considérée comme l'une des réactions les plus anciennes et les plus spécifiques de l'histochimie. Aujourd'hui, l'une des applications les plus importantes de la réaction de Feulgen est la quantification des quantités d'ADN. Un autre domaine est l'étude de l'organisation structurelle de l'ADN in situ.
Lorsque l'ADN est exposé à un environnement légèrement acide, les bases puriques se détachent du sucre désoxyribose, exposant les groupes aldéhydes libres et laissant intact le squelette de l'ADN. La molécule d'ADN devient "apurinique". Sous cette forme, les groupes aldéhydes libres peuvent se lier à un colorant tel que le réactif de Schiff et acquérir une couleur magenta. L'intensité de la coloration (développement de la couleur) est proportionnelle à la concentration d'ADN. La ploïdie de l'ADN peut être mesurée avec la réaction de Feulgen dans des suspensions nucléaires ou cellulaires étalées sur une lame, dans des plaques de culture cellulaire, dans des fluides biologiques et dans des coupes histologiques. Les cellules individuelles intactes isolées sont de loin les cibles les plus couramment utilisées pour déterminer la ploïdie de l'ADN avec la réaction de Feulgen.
La quantification de la réaction de Feulgen colorée a été réalisée à l'origine à l'aide de la cytophotométrie. Plus tard, on a découvert que la ploïdie de l'ADN pouvait également être mesurée à l'aide d'un cytofluoromètre microscopique. Cette méthode mesure la fluorescence émise par un noyau coloré avec des réactifs de Schiff ou de type Schiff. Aujourd'hui, les quantités d'ADN sont généralement mesurées à l'aide d'un cytomètre à image électronique.
Pour que la réaction de Feulgen soit spécifique, la fixation des tissus doit être appropriée. Les tanins végétaux peuvent interférer avec la réaction de Feulgen dans une certaine mesure, ce qui la rend inutile en tant que méthode quantitative. Le formaldéhyde est le fixateur préféré, car il se lie aux tanins cellulaires et les empêche de réagir avec la chromatine nucléaire.
Synonymes, antonymes
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En rapport avec "Feulgen"
Un colorant est une substance capable de teindre les fibres végétales et animales.
Un colorant naturel, ou pigment naturel, est une substance capable de teindre les fibres végétales et animales.
Un colorant vital est une substance, un colorant, qui colore des organismes ou des parties de ceux-ci sans entraîner leur mort.
La coloration est un changement de teinte ou de couleur (de quelque chose), en le peignant, le teignant, l'ombrageant ou via une réaction physiologique.