Cytométrie
Définition
La cytométrie est l'analyse des caractéristiques (mesures) des cellules soit par l'inspection microscope ou la mesure automatisée des propriétés particulières par un cytomètre. La cytométrie en flux est une technique qui peut fournir des informations quantitatives et qualitatives sur les cellules biologiques et les microparticules.
Analyse par cytométrie en flux :
Les deux exigences de la cytométrie en flux sont : 1) une seule cellule à la fois peut être présente au point d'analyse, et 2) chaque cellule qui passe doit être éclairée par la même intensité de lumière.
Explications
L'information se trouve dans la lumière qui a interagi avec les cellules lorsqu'elles passent l'une après l'autre et une à la fois à travers une région étroite éclairée par un ou plusieurs lasers. La machine qui permet de telles études est un cytomètre en flux, omniprésent dans les laboratoires biomédicaux, cliniques, d'ingénierie et environnementaux. Sa conception comprend la fluidique, l'optique d'éclairage, la photodétection, l'analyse des données et, dans certains modèles, le tri des cellules.
Cytométrie en flux
La cytométrie en flux est une méthode d'analyse automatique de cellules individuelles entraînées par un flux liquide. Les cellules, excitées par une source lumineuse (par exemple un laser) émettent des signaux de diffusion de la lumière (relatifs à la taille et à la réfringence de la cellule) ainsi que des signaux de fluorescence.
La fluorescence émise peut être spontanée (par exemple fluorescence de la chlorophylle) ou conférée par un colorant fluorescent. La mesure simultanée de ces signaux permet de caractériser chaque particule et de distinguer des populations cellulaires. On utilise un cytomètre en flux (ou un cytofluomètre) pour cette méthode.
La cytométrie en flux est une technique qui peut employer des méthodes sérologiques (mais pas nécessairement), qui analyse les cellules en suspension dans un milieu liquide par la lumière, la conductivité électrique, ou de la fluorescence que les cellules laissent individuellement passer à travers un petit orifice.
La cytométrie de flux est une technologie biophysique basée sur l'utilisation de la lumière laser, utilisé dans le comptage et le tri des cellules en fonction de caractéristiques morphologiques, la présence de marqueurs biologiques, et dans l'ingénierie des protéines. Dans les cytomètres en flux, les cellules en suspension dans le fluide ils traversent un tube transparent très fin sur lequel tombe un mince rayon de lumière laser, la lumière transmise et diffusée par le passage des cellules à travers le tube est collectée au moyen de dispositifs de détection, permettant de faire des inférences de taille et de complexité des cellules. Il permet également l'analyse simultanée de plusieurs paramètres d'autres caractéristiques physiques et chimiques, évaluant en moyenne plus de deux mille particules par seconde.
La cytométrie en flux est une technique utilisée couramment dans de nombreux centres de santé pour le diagnostic et la surveillance de nombreuses maladies telles que les leucémies, la granulomatose chronique et le SIDA; cependant, il a de nombreuses autres applications dans la recherche fondamentale, la pratique et les essais cliniques. Une variante courante de cette technique est la séparation physique des particules en fonction de leurs propriétés, utilisée par exemple pour purifier les populations d'intérêt.
Applications
La technologie de cytométrie en flux a des applications dans de nombreux domaines, notamment la biologie moléculaire, l'immunologie, la biologie végétale et marine.
Elle a une large application en médecine (notamment en transplantation, hématologie, immunologie tumorale et chimiothérapie, diagnostic prénatal, génétique et sélection des spermatozoïdes pour une présélection sexuelle).
Elle est particulièrement utile dans le domaine de la biologie moléculaire lorsque des anticorps marqués par fluorescence sont utilisés. Ces anticorps spécifiques lient les antigènes aux cellules cibles et aident à fournir des informations sur les caractéristiques spécifiques des cellules glanées à partir du cytomètre.
En biologie marine, les propriétés autofluorescentes du plancton photosynthétique ont été exploitées pour caractériser l'abondance et la structure de la communauté.
En ingénierie des protéines, la cytométrie en flux est utilisée en conjonction avec des techniques d'expression chez la levure et l'expression chez les bactéries, pour identifier les protéines exprimées à la surface cellulaire qui possèdent les caractéristiques souhaitées.
Cytophotométrie
En cytologie, la cytophotométrie consiste en une mesure de l'absorption de la lumière, par photométrie microscopique, pour les cellules ayant un cytoplasme, afin de déterminer les diverses substances contenue dans celle-ci. Elle a été développée par l'histologiste suédois T. Casperson en 1936.
La cytophotométrie est donc un procédé quantitatif en cytochimie; elle est utilisée pour déterminer la composition chimique des cellules dans une préparation histologique sur la base de l'absorption de lumière par les cellules.
La cytophotométrie est généralement utilisée dans le domaine visible du spectre, elle permet également l'utilisation de la couleur naturelle de substances individuelles ou, plus souvent, la coloration artificielle des préparations avec des colorants histochimiques spéciaux, qui vont se combiner avec les composants chimiques de la cellule dans des quantités déterminées. La majorité des colorants aident à la détermination des acides nucléiques et des protéines et leurs groupes réactifs individuels dans la cellule et à déterminer l'activité de nombreuses enzymes.
Synonymes, antonymes
2 synonymes (sens proche) de "cytométrie" :
0 antonyme (sens contraire).
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