ELISA
Définition
Le test ELISA (enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) est un test immunologique très spécifique (système "clé-serrure") qui permet de détecter et de doser la protéine de l'allergène concerné dans un prélèvement de poussière. 1 allergène = 1 test immunologique.
ELISA (dosage immuno-enzymatique) est une technique de dosage sur plaque conçue pour détecter et quantifier des substances solubles telles que des peptides, des protéines, des anticorps et des hormones.
Il existe quatre principaux types d'ELISA : ELISA direct, ELISA indirect, ELISA sandwich et ELISA compétitif. Chacun a des avantages, des inconvénients et des convenances uniques.
Explications
Le test ELISA repose sur l'apparition ou non d'une coloration révélatrice de la liaison entre un allergène (Ag) et un anticorps (Ac) qui s'assemblent et forment ainsi un complexe.
Dans un test ELISA, l'antigène est immobilisé sur une surface solide. Cela se fait soit directement, soit via l'utilisation d'un anticorps de capture lui-même immobilisé sur la surface. L'antigène est ensuite complexé à un anticorps de détection conjugué à une molécule susceptible d'être détectée telle qu'une enzyme ou un fluorophore.
Si l'allergène souhaité est présent dans le prélèvement analysé, le complexe Ag/Ac se forme. Le marqueur coloré informe de la formation du complexe et donc de la présence de l'allergène. L'intensité de la coloration permet de savoir en quelle quantité est présent l'allergène.
Cette technique de dosage de protéines consiste en la fixation sur la ou les protéines à doser d'anticorps spécifiques auxquels ont été liées des enzymes. Une réaction avec l'enzyme produit une coloration dont l'intensité est fonction de la quantité d'enzymes et qui sera donc mesurée.
Un test ELISA est généralement effectué dans une plaque multipuits (96 ou 384 puits), qui fournit la surface solide pour immobiliser l'antigène. L'immobilisation des analytes facilite la séparation de l'antigène du reste des composants de l'échantillon. Cette caractéristique fait d'ELISA l'un des tests les plus faciles à effectuer sur plusieurs échantillons simultanément.
Types de tests ELISA
Dans un ELISA direct, l'antigène est immobilisé à la surface de la plaque multipuits et détecté avec un anticorps spécifique de l'antigène. L'anticorps est directement conjugué à la HRP ou à d'autres molécules de détection.
L'ELISA indirect est une technique qui utilise un processus de détection en deux étapes, dans lequel un anticorps primaire spécifique de l'antigène se lie à la cible et un anticorps secondaire marqué contre l'espèce hôte de l'anticorps primaire se lie à l'anticorps primaire pour la détection. Comme pour les tests ELISA directs, l'antigène est immobilisé à la surface de la plaque multipuits. La méthode peut également être utilisée pour détecter des anticorps spécifiques dans un échantillon de sérum en substituant le sérum à l'anticorps primaire.
L'ELISA sandwich est le format le plus couramment utilisé. Ce format nécessite deux anticorps spécifiques de différents épitopes de l'antigène. Ces deux anticorps sont normalement appelés paires d'anticorps appariés. L'un des anticorps est enduit sur la surface de la plaque multi-puits et utilisé comme anticorps de capture pour faciliter l'immobilisation de l'antigène. L'autre anticorps est conjugué et facilite la détection de l'antigène.
Également connus sous le nom d'ELISA d'inhibition ou d'immunodosage compétitif, les tests ELISA compétitifs mesurent la concentration d'un antigène en détectant l'interférence du signal. Chacun des formats précédents peut être adapté au format compétitif. L'antigène de l'échantillon entre en compétition avec un antigène de référence pour se lier à une quantité spécifique d'anticorps marqué. L'antigène de référence est pré-enduit sur une plaque multi-puits et l'échantillon est pré-incubé avec un anticorps marqué et ajouté aux puits. Selon la quantité d'antigène dans l'échantillon, plus ou moins d'anticorps libres seront disponibles pour se lier à l'antigène de référence. Cela signifie que plus il y a d'antigène dans l'échantillon, moins l'antigène de référence sera détecté et plus le signal sera faible.
Synonymes, antonymes
Voir tous les synonymes pour "ELISA".1 synonyme (sens proche) de "eLISA" :
- dosage immuno-enzymatique
0 antonyme (sens contraire).
Les mots ou les expressions apparentés à ELISA sont des termes qui sont directement liés les uns aux autres par leur signification, générale ou spécifique.
Le mot ELISA est dans la page 2 des mots en E du lexique du dictionnaire.
Mots en E à proximité
élevage en eau verte élevage intégréélevage monosexe éleveur de poisson éliciteur ELISAélixir elliptiqueélodée élongation éluvial
En rapport avec "ELISA"
Un immunoessai consiste en toute technique qui utilise la réaction antigène-anticorps pour la détection et la quantification d'antigènes, d'anticorps...
Un anticorps est une protéine produite par le système immunitaire d'un organisme en réaction à un antigène étranger.
Un antigène est une toxine ou une autre substance étrangère de l'organisme qui induit une réponse immunitaire avec formation d'anticorps.
Une enzyme est un catalyseur biologique, presque toujours une protéine. Elle accélère le déroulement d'une réaction chimique spécifique dans la cellule.