Dénombrement de cellules
Définition
Le dénombrement de cellules microbiennes est la mesure directe de la croissance microbienne par le comptage du nombre de cellules (des bactéries par exemple) à l'aide d'un microscope ou d'un compteur spécial.
Schéma pour un dénombrement (comptage) de cellules :
Des estimations approximatives des taux de croissance peuvent être faites en mesurant régulièrement le diamètre d'une colonie bactérienne ou fongique lorsqu'elle se propage à partir d'un point central pour couvrir la surface d'un milieu de croissance solide (comme une gélose)
Explications
Un comptage de cellules (viables) permet d'identifier le nombre de cellules en croissance/division active dans un échantillon. La méthode de comptage sur plaque ou plaque d'étalement repose sur des bactéries qui développent une colonie sur un milieu nutritif. La colonie devient visible à l'oeil nu et le nombre de colonies sur une plaque peut être compté. Il est alors possible de faire un dénombrement de colonies après culture.
Normalement, des comptages de cellules viables sont effectués. La principale définition de la viabilité est la capacité du micro-organisme à se multiplier. Des milieux et des conditions de culture optimaux sont nécessaires.
Numération
La méthode conventionnelle de numération des cellules viables ou de numération sur plaque standard est utilisée depuis plus d'un siècle. Il s'agit de préparer des aliments dans une bouillie, puis de les diluer en série (série 1 :10) jusqu'à une concentration finale souhaitée comprise entre 1 :100 et 1 :1 000 000 en fonction de la concentration estimée de la population microbienne. Ensuite, les liquides dilués sont pipetés avec précision dans une boîte de Pétri stérile (généralement 0,1 ou 1 ml), puis de la gélose nutritive fondue (48 °C) est versée dans la boîte de Pétri. Après solidification de la gélose, les boîtes de Pétri sont ensuite placées dans l'incubateur à la température souhaitée, par exemple 32 °C, 35 °C ou d'autres températures pour les micro-organismes, pour former des colonies visibles, généralement 24 à 48 h avant le comptage le nombre de colonies et en convertissant le nombre en comptes par millilitre ou par gramme de nourriture. Bien que cette procédure séculaire soit pratiquée partout dans le monde, elle prend du temps, demande beaucoup de travail et gaspille de la verrerie et un grand nombre d'articles jetables, tels que des pipettes en plastique et des boîtes de Petri. Plusieurs méthodes ingénieuses ont été développées pour rendre le comptage des cellules viables plus efficace, automatique et rentable. Ces nouvelles méthodes ont d'abord été conçues pour effectuer des comptages de cellules viables totales, mais plus récemment, grâce aux améliorations du développement des médias et à des tests supplémentaires, ces méthodes peuvent également détecter et dénombrer des agents pathogènes tels que Salmonella, E. coli (O157 :H7) et d'autres agents pathogènes.
Synonymes, antonymes
4 synonymes (sens proche) de "dénombrement de cellules" :
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