Bleu de crésyl

Définition

Le bleu de crésyl est un colorant (vital), pour mettre en évidence les physodes des algues brunes et les réticulocytes d'une moelle osseuse. La coloration a lieu via la liaison des molécules de colorant à des charges positives dans le tissu ou à des organites cellulaires tels que les ribosomes.

Proche du bleu du Nil, il est moins toxique. Il est utilisé en phycologie et hématologie comme colorant qui permet la coloration vitale ou supravitale (colorant vital) des cellules.

Le bleu de crésyl brillant est une coloration supravitale utilisée pour compter les réticulocytes. Il est classé comme un colorant oxazine. Des masques anti-poussière, des lunettes de protection et des gants N95 doivent tous être portés lors de la manipulation du produit chimique.

Des molécules de bleu de crésyl brillant :

Différentes structures de bleu de crésyl brillant. Seuls les cations sont représentés, les ions chlorure correspondants ont été omis.

Chimie

Le bleu de crésyl brillant appartient aux diaminobenzooxazines. Au cours du temps, il y a eu plusieurs structures en circulation, appelées bleude crésyl brillant (voir illustration). Même les oxazines apparentées étaient parfois répertoriées comme bleu de crésyl brillant. Enfin, il a également été partiellement déclaré comme nouveau bleu de méthylène.

⭐ Dans l'illustration ci-dessus, la structure (1) a été produite dans le Reich allemand avant le déclenchement de la Seconde Guerre mondiale, mais aussi peu après 1980. La structure (2) est la structure préférée de Color Index International, mais elle n'a probablement jamais été disponible dans le commerce. La troisième structure (3) est fabriquée aux États-Unis depuis les années 50. Dans certains cas, cela est porté sous le nom de bleu de crésyl brillant ALD. La dernière structure illustrée (4) a également été produite aux États-Unis après la Seconde Guerre mondiale.

L'absorption maximale du colorant dans une solution éthanolique à 50 % est de λ max = 622 nm. Il est vendu soit sous forme de chlorure d'hémi-zinc, soit sous forme de chlorure. Le cation lui-même (voir figure) est faiblement hydrophobe. Le bleu de crésyl brillant peut être stocké dans un endroit sombre et verrouillé.

Applications

Le bleu de crésyl brillant a une longue histoire d'application en biologie cellulaire. Une solution faiblement alcoolique du colorant est utilisée pour teindre les échantillons ou le colorant est dissous dans de l'eau distillée. La méthode a été décrite par Lavaditi vers 1901 et a été initialement utilisée pour colorer les plaquettes sanguines (thrombocytes) chez les patients atteints de leucémie. La coloration supravitale utilisant du bleu de crésyl brillant a également été introduite pour les réticulocytes à ce moment-là. La méthode a été développée sur la base des connaissances de Nakanishi, dont la coloration bactérienne avec du bleu de méthylène effectué. La pénétration du sperme dans les ovocytes a pu être observée à travers le bleu de crésyl brillant. Il est également utile pour tester les globules rouges pour une activité de glucose-6-phosphate déshydrogénase correcte.

Enfin, le colorant peut également être utilisé pour vérifier comment Blastocystis hominis, un pathogène parasite eucaryote provoquant la diarrhée, réagit chez l'homme après un traitement médicamenteux.

Le bleu de crésyl brillant peut également être utilisé pour le comptage des réticulocytes dans le sang ou la moelle osseuse ou pour l'examen des érythroblastes pathologiques.

En plus de colorer des spécimens animaux, il est également possible de colorer divers tissus végétaux, par exemple pour observer la division du noyau. Des préparations vitales et des préparations permanentes colorées au bleu de crésyl brillant peuvent être produites. Cela permet, par exemple, la comparaison des chromosomes fixes et "vivants". La coloration peut également être utilisée pour examiner d'autres organites cellulaires. Dans ce contexte, Harold Joel Conn a également décrit un retard dans la croissance des cellules tumorales dû au colorant.

Plus récemment, des études ont été menées sur l'utilisation du bleu de crésyl brillant dans la fécondation in vitro. Avec l'aide du colorant, il est possible de sélectionner des ovules avec un bon potentiel de développement. Des études correspondantes ont été menées sur des ovules de souris et de chiens.

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