Titrage biologique
Définition
Le titrage biologique consiste en un bioessai de l'analyse biologique réalisée sur des cellules ou organismes vivants, pour détecter parfois des quantités infimes de substances qui influent sur la croissance.
Le titrage biologique consiste en une estimation quantitative de substances biologiquement actives, par exemple l'estimation de l'acide indole acétique (AIA) produit par Azotobacter.
Un titrage biologique de lentivirus :
Exemple de processus de titrage biologique de lentivirus (voir les explications ci-dessous). Le titrage biologique viral de lentivirus permet de bien démarrer les expériences.
Explications
Le titrage biologique est une terme qui, par définition, est utilisé pour l'évaluation de la toxicité basée sur l'utilisation de différents organismes, en incluant un paramètre tel que la demi-vie du produit.
Voir aussi l'écotoxicologie.
Le titrage américain est un système de référence de longueur de fil de filet par unité de poids, soit en mètres par kilogramme, soit en yards par livre; par exemple, un titrage de 4 000 m/kg.
Quel que soit l'objectif final, qu'il s'agisse d'expression de protéines, de criblage à haut débit, d'ingénierie cellulaire, etc., prendre le temps de titrer les virus augmentera la probabilité d'une transduction réussie. Connaître le nombre de particules, ou d'unités infectieuses, dans la préparation virale est important car il détermine en grande partie l'efficacité de la transduction (c'est-à-dire combien de virus pénètrent dans une cellule), et donc le nombre de copies de gènes intégrés dans la cellule cible transduite. Il vaut donc la peine de prendre le temps de comprendre les différentes méthodes de mesure et leurs relations les unes avec les autres.
Il existe deux types de mesure courants : physique, qui détermine la concentration des particules en mesurant les quantités correspondantes d'acide nucléique ou de protéines, ou fonctionnelle, qui compte les particules capables de transduction productive (IFU/ml). Pour comprendre ce qui est mesuré dans ces méthodes, considérons un flux de travail de production lentivirale (image ci-dessus pour le titrage des lentivirus) pour voir ce qui est produit dans une préparation typique.
Les lentivirus recombinants sont produits en clonant une séquence d'intérêt dans un squelette lentiviral contenant tous les éléments agissant en cis nécessaires à la fonction virale. Le vecteur de transfert résultant est ensuite mélangé avec un mélange d'emballage à base de plasmide qui fournit toutes les protéines virales nécessaires à la production de particules virales dans une cellule d'emballage. Les vecteurs de transfert et d'emballage sont ensuite combinés avec un réactif de transfection (lipide ou polymère), et le mélange est utilisé pour transfecter une lignée cellulaire productrice, généralement des cellules à base de 293T, qui peuvent exprimer efficacement les constructions transfectées.
Le résultat est la libération de particules virales dans le surnageant. Cette sortie comprend des particules entièrement complètes et infectieuses, des particules non infectieuses et des protéines de capside libres (c'est-à-dire p24). Les mesures de titrage physique - qRT-PCR, p24 ELISA et Lenti-X GoStix Plus - sont relativement simples à réaliser, mais comptent les particules virales fonctionnelles et non fonctionnelles (directement et/ou via l'analyse des composants viraux libérés dans le surnageant). En revanche, les méthodes de titrage fonctionnel quantifient spécifiquement les particules capables de transduire les cellules cibles (c'est-à-dire les unités infectieuses ou IFU), mais sont plus longues et plus laborieuses.
Synonymes, antonymes
0 synonyme (sens proche) pour "titrage biologique".
0 antonyme (sens contraire).
Les mots ou les expressions apparentés à TITRAGE BIOLOGIQUE sont des termes qui sont directement liés les uns aux autres par leur signification, générale ou spécifique.
L'expression TITRAGE BIOLOGIQUE est dans la page 3 des mots en T du lexique du dictionnaire.
Mots en T à proximité
tissu osseux tissu ostéoïde tissu secondaire tissu végétal titrage titrage biologiquetitrant toile à bluter toise toit optique toluène
En rapport avec "titrage biologique"
Un bioessai est une évaluation de la toxicité d'une substance par l'observation, en laboratoire, de ses effets sur un organisme vivant.
Les lentivirus sont des virus à ARN appartenant à la famille des Retroviridae, une classe de virus appelés rétrovirus qui ont un génome à ARN plutôt qu'à ADN.
Le titrage ou la titrimétrie est une méthode d'analyse chimique quantitative en laboratoire utilisée pour déterminer la concentration inconnue d'un réactif à...
Le titrant complète l'analyte dans un titrage ou une analyse volumétrique, une méthode d'analyse chimique quantitative en laboratoire utilisée pour déterminer...