Vecteur navette
Définition
Un vecteur navette est un plasmide qui peut être présent chez plusieurs espèces; peut être utilisé pour transporter des clones d'ADN d'un organisme à l'autre; utilisé en génie génétique. Un vecteur navette est un plasmide contenant une origine de réplication pour deux organismes différents.
Les vecteurs navettes qui peuvent se répliquer dans les cellules eucaryotes et procaryotes sont des outils puissants pour l'étude du réarrangement et de la mutagenèse de l'ADN dans les systèmes cellulaires.
Un vecteur navette pour la levure :
Pour qu'un vecteur navette se développe à la fois dans la levure et dans E. coli, il doit avoir plusieurs éléments essentiels : deux origines de réplication, une pour E. coli et une pour la levure; une séquence de centromère de levure de sorte qu'elle soit répartie dans les cellules filles lors de la réplication de la levure; des marqueurs sélectionnables pour la levure et E. coli; et un site de clonage multiple pour insérer le gène d'intérêt.
Explications
Les vecteurs navettes ont plusieurs caractéristiques essentielles. Afin d'être maintenus dans les cellules bactériennes, ils contiennent une origine bactérienne de réplication et un gène de résistance aux antibiotiques. Pour le maintien dans les cellules de mammifères, ils contiennent une origine de réplication virale de mammifère et, dans certains cas, un autre marqueur de résistance aux antibiotiques sous le contrôle d'un promoteur de mammifère et de signaux de traitement. De plus, un gène cible est choisi de sorte que les mutations de ce gène puissent être facilement identifiées dans les bactéries. Le vecteur plasmidique est transfecté dans des cellules de mammifères. Le traitement mutagène est appliqué soit avant la transfection, soit à n'importe quel stade suivant celle-ci.
Après une période d'expression appropriée, l'ADN plasmidique est extrait des cellules de mammifères, purifié de l'ADN génomique et utilisé pour transformer des souches indicatrices de bactéries, dans lesquelles les cellules contenant des molécules plasmidiques mutées sont identifiées soit par la couleur de la colonie, soit parce qu'elles sont les seules cellules qui se développeront dans le milieu sélectif approprié. Les systèmes de vecteurs navettes utilisés à ce jour sont presque tous basés soit sur le SV40, soit sur les systèmes de réplication du virus Epstein-Barr (EBV).
Synonymes, antonymes
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Mots en V à proximité
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En rapport avec "vecteur navette"
L'ADN (l'acide désoxyribonucléique) est la molécule qui transporte l'information génétique nécessaire au développement et au fonctionnement d'un organisme.
Le génie génétique est la fabrication et la manipulation in vitro de matériel génétique.
Un plasmide se présente sous forme de courts fragments d'acide nucléique capables de se multiplier indépendamment des chromosomes de la cellule...
Un vecteur de clonage est un plasmide recombiné (phagémide) qui, grâce à sa réplication autonome, permet de cloner des gènes.