Plasmide recombinant

Définition

Un plasmide recombinant est un plasmide dans lequel un fragment d'ADN étranger ou un gène a été inséré. Les plasmides sont de petits morceaux circulaires d'ADN qui existent naturellement dans les cellules bactériennes et chez certains eucaryotes tels que les levures et les plantes. Les plasmides recombinants se répliquent indépendamment de l'ADN chromosomique de l'hôte.

La formation de plasmide recombinant.:

La formation de plasmide recombinant implique la construction d'ADNr, dans laquelle un fragment d'ADN étranger est inséré dans un vecteur plasmidique. Le gène indiqué par la couleur blanche est inactivé lors de l'insertion du fragment d'ADN étranger illustré par des pièces de puzzle.

Explications

Typiquement, un plasmide recombinant d'ADN est linéarisé en introduisant un nombre modéré de coupures double brin aléatoires à l'aide de DNAse I et est soumis à une digestion par une enzyme de restriction appropriée à un site unique à proximité du site de l'amorce de séquençage.

⭐ La technologie de l'ADN recombinant a été rendue possible grâce à la découverte et à l'application d'enzymes de restriction pour lesquelles Werner Arber, Daniel Nathans et Hamilton Smith ont reçu le prix Nobel de médecine en 1978.

Grâce aux progrès récents de la biologie moléculaire, il est désormais possible de mélanger le matériel génétique de plusieurs organismes (clonage moléculaire) pour créer des séquences d'ADN qui, autrement, ne se trouvent pas naturellement dans les organismes biologiques. Des techniques comme le clonage moléculaire sont utilisées pour créer ces molécules d'ADNr dans les laboratoires. Des vecteurs sont utilisés pour transférer et exprimer ces fragments d'ADNr étrangers dans des organismes hôtes appropriés tels que des bactéries. La technologie R-ADN a ouvert un tout nouveau monde dans la recherche scientifique. La technologie R-DNA utilise des séquences palindromiques et aboutit à la création d'extrémités émoussées et collantes (décalées). Depuis son développement, de nombreux organismes et produits alimentaires ont été génétiquement modifiés. En utilisant la technologie de l'ADNr et des molécules d'ADN synthétiques, littéralement n'importe quelle séquence d'ADN peut être créée et insérée dans n'importe lequel d'un très large éventail d'organismes vivants. Il n'est donc pas surprenant que ce sujet suscite également de nombreuses controverses.

✅ La sélection des clones de plasmide recombinant souhaités est normalement accomplie après transformation d'espèces sélectionnées de micro-organismes hôtes avec de l'ADN ligaturé. Les produits de ligation compétents pour la réplication ne constituent qu'une fraction des molécules d'ADN dans le mélange de ligation. Par conséquent, lorsqu'un mélange de ligature, et non un plasmide pur, est utilisé pour la transformation, une plus grande efficacité de transformation est nécessaire pour obtenir un nombre suffisant de transformants.

En rapport avec "plasmide recombinant"

• ADN recombinant

  

  L'ADN recombinant (ADN recombiné) est une molécule d'ADN artificiel formée délibérément in vitro (par des méthodes de laboratoire de recombinaison génétique)...

• chromosome recombinant

  

  Un chromosome recombinant résulte d'inversions péricentriques parentales. Les chromosomes recombinants fournissent des délétions terminales et des duplications...

• plasmide

  

  Chez les procaryotes et quelques eucaryotes, le plasmide se présente sous forme de courts fragments d'acide nucléique capables de se multiplier indépendamment...

• plasmide Ri

  

  Un plasmide Ri est un plasmide de la bactérie Agrobacterium rhizogenes qui induit la production de racines.